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INHALT WTM 11/2005

K. Schöpf, W. Gaede und M. Matt:
Erfahrungen zur Bekämpfung der Bovinen Virus Diarrhoe (BVD/MD) mit spezieller Berücksichtigung der Verbreitung von BVDV-Genotypen im Bundesland Tirol

D. Suppin und F.J.M. Smulders:
Zum Hygienestatus von frischen Fischfilets auf Handelsebene

A. Bilek, K. Staniek, R.A. Hirt, J.G. Thalhammer, M. Hofmann-Parisot und H. Nohl
Antioxidantienstatus im Plasma gesunder Hunde in Abhängigkeit vom Alter

W. Baumgartner, J. Damoser und J.L. Khol:
Vergleich zweier serologischer Untersuchungen der österreichischen Rinderpopulation zur Verbreitung der bovinen Paratuberkulose (Johne’sche Krankheit) in den Jahren 1995 - 97 und 2002/03 sowie Vorstellung geplanter Bekämpfungsmaßnahmen

Erfahrungen zur Bekämpfung der Bovinen Virus Diarrhoe (BVD/MD) mit spezieller Berücksichtigung der Verbreitung von BVDV-Genotypen im Bundesland Tirol

K. SCHÖPF ¹, W. GAEDE² und M. MATT¹
Vet. med. Austria/Wien. Tierärztl. Mschr. 92 (2005), 254 - 258

Schlüsselwörter: BVD-Virus, Genotypen, Prävalenz, realtime RT-PCR, Bekämpfungsprogramm.

Zusammenfassung
Ein bundesweites und verpflichtendes BVD-Bekämpfungsprogramm existiert in Österreich seit dem 1. August 2004. In Tirol wurde die BVD-Virus-Infektion allerdings schon seit 1999 freiwillig in enger Zusammenarbeit mit der Veterinärabteilung der Tiroler Landesregierung bekämpft. Primäres Ziel war die Eradikation des Virus ohne Impfung, wobei das Erkennen und anschließende Ausmerzen von persistent infizierten Tieren im Vordergrund standen. Durch ein jährliches Screening konnte deren Anteil in Tiroler Rinderbeständen von ursprünglich 1,22 % auf 0,37 % gesenkt werden. Der Nachweis von BVDV-Antigen erfolgte mittels kommerzieller ELISA-Testkits. In der vorliegenden Studie wurden im Frühjahr 2003 von 45.871 untersuchten Rindern im Alter von 14 Tagen bis 18 Monaten 169 Tiere im ELISA als Antigen-positiv erkannt (Prävalenzrate 0,37.%). Bei einer Wiederholungsuntersuchung nach 8 Wochen wurden von 101 Tieren Blutproben gewonnen. Alle Proben waren wieder im Antigen-ELISA positiv. Insgesamt wurden 193 von diesen im Antigen-ELISA positiven Serumproben am Landesamt für Verbraucherschutz Sachsen-Anhalt in Stendal mittels Genotypisierung auf das Vorkommen von BVDV-2 untersucht. Anhand dieser Untersuchungen wurde gezeigt, dass in der Tiroler Rinderpopulation bisher kein BVDV-2 nachgewiesen werden konnte.

Keywords: BVDV, genetic types, prevalence, real-time RTPCR,
eradication.

Summary
Experience in BVDV eradication in Tyrol’s cattle with special consideration of the occurrence of BVDV genotypes

Introduction
On August 1, 2004, the Austrian government enacted BVD-regulation and introduced a compulsory national BVD-control program. In Tyrol, BVDV eradication had already started on a voluntary basis in 1999. The main aim of this voluntary control scheme on a farm level was the identification and elimination of all persistently infected animals without vaccination. The annual screening revealed a decrease of the proportion of these PI-animals from 1.22 to 0.37 %.

Methods
During surveillance activities in the year 2003, out of 45,871 blood samples from cattle at the age of 2 weeks to 18 months, 169 samples were BVDV antigen capture ELISA positive (prevalence rate 0.37 %). In the course of a second blood test 8 weeks later, 101 animals were retested. In the laboratory, commercially available antigen capture ELISA technique is routinely used to detect BVDV antigen in serum. For the detection of virus genomes a real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction
(RT-PCR) was applied.

Results
Totally 193 of these antigen ELISA positive blood samples were tested by RT-PCR at the Landesamt für Verbraucherschutz Sachsen Anhalt in Stendal for the occurrence of BVDV-2. All samples were classified as BVDV-1 and no BVDV-2 could be detected in bovine field samples from the Tyrol region.

Conclusion
The removal of persistently infected animals is the long term basis of the BVDV eradicaton program in Tyrol. In all BVDV positive field samples BVDV-1 genome could be detected by RT-PCR.

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Zum Hygienestatus von frischen Fischfilets auf Handelsebene

D. SUPPIN und F.J.M. SMULDERS
Vet. med. Austria/Wien. Tierärztl. Mschr. 92 (2005), 259 - 264

Schlüsselwörter: Frischfisch, Filet, Mikrobiologie, MAP, Scherbeneis, Wien.

Zusammenfassung
Am Institut für Fleischhygiene, Fleischtechnologie und Lebensmittelwissenschaft der Veterinärmedizinischen Universität wurde an Frischfischproben (n=100) ein breites Spektrum von Mikroorganismen erhoben. Bezug nehmend auf die Taxonomie wurden folgende Genera bzw. Species untersucht: Pseudomonas spp., Aeromonas spp., E. coli, Staphylococcus spp ., Staphylococcus aureus, Campylobacter spp., Salmonella spp., Bacillus cereus, Clostridium perfingens, Listeria spp., Yersiniaspp. und Vibriospp., ebenso die Familia der Enterobacteriaceen. E. coli und Listeria spp. wurden mittels MPN Technik quantifiziert. Die Keimflora von Süßwasser- und Seefischfilets wurde auf signifikante Unterschiede mittels t-Test geprüft. Ebenso wurde die Keimflora von 2 verschiedene Lagerungsarten, nämlich MAP Fischfilet und auf Scherbeneis gelagertes Fischfilet auf signifikante Unterschiede geprüft. Die erhobene Gesamtkeimzahl ergab einen Medianwert von 10^6,45 kbE/g und war von Pseudomonas spp. dominiert (Medianwert 10^6,11 kbE/g). Bei 63 % der Proben war mit Gesamtkeimzahlen > 10⁶ kbE/g schon ein beginnender Verderb anzunehmen.

Keywords: fresh fish, fillet, microbiology, modified atmosphere package, crush ice, Vienna.

Summary
A note on the microbial quality of fresh fish fillets from Viennese retail shops

Introduction
The purpose of this paper was to establish the degree of freshness and the microbiological quality of fish fillets sold in Viennese retail shops.

Material and methods
A total of 100 fillets samples were collected (56 freshwater fish fillets from 5 species and 44 seawater fish fillets from 6 species) in Viennese retail shops. The following genera and species were assessed: Pseudomonas spp., Aeromonas spp., E. coli, Staphylococcus spp ., Staphylococcus aureus, Campylobacter spp., Salmonella spp., Bacillus cereus, Clostridium perfingens, Listeria spp., Yersinia spp. and Vibrio spp., as well as the familia of Enterobacteriaceae.

Results
The total aerobic count was 10^6.45 cfu/g (median value), with Pseudomonas spp. as dominating genera. In 63 % of the samples, total aerobic count exceeded 10⁶ cfu/g, which indicates near-spoilage conditions. Enterobacteriaceae levels were 10^3.46 cfu/g (median value). E. coli and Listeria spp. were detected in 22 and 28.% of the samples, respectively. This result prompts for improvements in hygiene. No sample tested positive for the pathogens Salmonella spp., Campylobacter spp., Vibrio spp. and Clostridium perfringens. Comparison of the fish fillets held on crushed ice with those in MA packaging revealed obvious differences. The total aerobic count in fish packed in MAP was 10^5.7 cfu/g, while the fish held on crushed ice was 10^6.47 cfu/g, with Pseudomonas spp. as dominant fraction. The well-known inhibition of the growth of spoilage bacteria by the use of CO2, and/or the inhibition of the usual aerobic flora, is a possible explanation for the lower levels of Pseudomonas spp. (difference 10^1.5) in fillets packed under modified atmosphere.

Conclusion
It is impossible to avoid bacterial contamination of fresh fish. It is however possible to obtain best results with proper hygienic handling of the fish and the equipment used, and to reduce the possibility of increase in the level of bacteria present in the fish through proper cooling or freezing and with proper preparation prior to consumption

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Antioxidantienstatus im Plasma gesunder Hunde in Abhängigkeit vom Alter

A. BILEK², K. STANIEK¹, R.A. HIRT², J.G. THALHAMMER², M. HOFMANN-PARISOT³ und H. NOHL¹
Vet. med. Austria/Wien. Tierärztl. Mschr. 92 (2005), 265 - 273

Schlüsselwörter: Hund, Alter, Plasma, Antioxidantien.

Zusammenfassung
Einige Alterstheorien gehen davon aus, dass freie Radikale in den Alterungsprozess involviert sind und mit zunehmendem Alter zu einem Mangel an Antioxidantien (AO) fuhren. Ziel dieser Studie war es zu uberprufen, ob es beim gesunden Hund zu einer altersabhangigen Abnahme der AO im Blutplasma kommt. Dazu wurden 95 Rassehunde (davon 45 Beagles und 15 Deutsche Schaferhunde) und 9 Mischlingshunde im Alter von 0,5-13,8 Jahren untersucht. Mittels Anamnese, klinischer, sowie blutchemischer und
hamatologischer Untersuchung wurde sichergestellt, dass das Hundekollektiv (57 Ruden, 47 Hundinnen) gesund war. Die Hunde erhielten unterschiedliche, jedoch ausgewogene Diaten ohne zusatzliche Vitaminsupplementation. Der Status lipid- und wasserloslicher AO im Blutplasma der nuchternen Hunde wurde mittels Luminol-induzierter Photochemilumineszenz bestimmt. Im Gesamtkollektiv ergaben sich weder bei den wasserloslichen AO (35,9 ± 9,8 vs. 35,5 ± 10,5 µmol/l Trolox-Aquivalente) noch bei
den lipidloslichen AO (61,4 ± 27,0 vs. 53,0 ± 19,3 µmol/l
α-Tocopherol-Aquivalente) signifikante Unterschiede.
Unabhangig vom Geschlecht korrelierten die wasserloslichen
AO weder mit dem Alter noch mit der Korpermasse.
Bei den Ruden zeigte sich sowohl eine geringe positive
Korrelation zwischen lipidloslichen AO und dem Alter (r = 0,262;
p = 0,049) als auch der Korpermasse (r = 0,335; p = 0,011). Bei den wasserloslichen AO wiesen die Schaferhunde hohere Werte als die Beagles auf (p = 0,01; n = 15), nicht jedoch bei den lipidloslichen AO. Auf Grund der vorliegenden Daten kann beim alteren gesunden Hund bei ausgewogener Ernahrung eine zusatzliche Verabreichung
von AO nicht empfohlen werden.

Keywords: dog, age, plasma, antioxidants.

Summary
ntioxidative status in the plasma of healthy dogs in dependence of age

Introduction
Some theories of ageing postulated the involvement of free radicals in the ageing process which is accompanied by a deficiency of antioxidants (AO). The aim of this study was to investigate whether healthy dogs exhibit an agedependent decrease of AO in blood plasma.

Methods
95 pedigreed dogs (45 Beagle and 15 German shepherd dogs) and 9 mongrel dogs, 0.5 to 13.8 years old, were studied. Anamnesis, clinical examination, blood biochemistry and haematology ensured that all dogs (57 males, 47 females) were healthy. Dogs were fed balanced diets not supplemented with additional amounts of vitamins. The status of lipid- and water-soluble AO in plasma of fasted overnight dogs was measured by means of Luminolinduced
photochemiluminescence.

Results
Neither water-soluble AO (35.9 ± 9.8 vs. 35.5 ± 10.5 µmol/l Trolox-equivalents) nor lipid-soluble AO (61.4 ± 27.0 vs. 53.0 ± 19.3 µmol/l á-tocopherol-equivalents) showed significant differences in males and females. Likewise no correlation was found between the capacity of water-soluble AO and age or body mass independent of sex. Whereas a slight positive dependency of lipid-soluble AO on age (r = 0.262, p = 0.049) and body mass (r = 0.335, p = 0.011) was observed in males. In the plasma of German shepherd dogs
higher capacities of water-soluble AO were detected in comparison
to Beagles (p = 0.01, n = 15) whereas no breed differences were found in the levels of lipid-soluble AO.

Conclusion
On the basis of present data an additional supplementation of AO to healthy ageing dogs fed balanced diets can not be recommended.

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Vergleich zweier serologischer Untersuchungen der österreichischen Rinderpopulation zur Verbreitung der bovinen Paratuberkulose (Johne’sche Krankheit) in den Jahren 1995 - 97 und 2002/03 sowie Vorstellung geplanter Bekämpfungsmaßnahmen

W. BAUMGARTNER¹, J. DAMOSER² und J.L. KHOL¹
Vet. med. Austria/Wien. Tierärztl. Mschr. 92 (2005), 274 - 277

Schlüsselwörter: Paratuberkulose, Rinderbetriebe, ELISA,
Seroprävalenz, Österreich.

Zusammenfassung
Bereits 1995 - 97 wurden in einer repräsentativen Studie Rinder aus ganz Österreich serologisch auf das Vorkommen von Antikörpern (Ak) gegen Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis ( MAP) untersucht (GASTEINER et al., 1999). In dieser Untersuchung waren 6,97 % der österreichischen Rinderbetriebe MAP-Ak positiv. In
den Jahren 2002/03 wurde im Rahmen einer weiteren Studie
(DREIER, 2003) erneut die Seroprävalenz von Ak gegen MAP in der österreichischen Rinderpopulation ermittelt. In dieser zweiten Untersuchung wurden 19,05 % positive Rinderbetriebe in Österreich festgestellt. Die Erhebung der Seroprävalenz erfolgte in beiden Fällen mittels Enzyme Linked Immuno Sorbent Assays (ELISA). Im Vergleich der beiden Untersuchungen zeigt sich eine signifikante
Zunahme der Prävalenz (p < 0,001) von MAP-positiven Rinderherden in Österreich von 1995 - 97 bis 2002/03.
Die vorliegenden Zahlen dokumentieren erstmals den signifikanten Anstieg der Paratuberkuloseprävalenz in der Rinderpopulation eines Staates in nur wenigen Jahren. Unter der Voraussetzung, dass (obwohl keine vergleichbaren Daten vorliegen) auch in anderen mitteleuropäischen Ländern eine ähnliche Entwicklung denkbar wäre, erscheint eine länderübergreifende Vorgangsweise zur
Bekämpfung der Paratuberkulose mit dem Schwerpunkt der Verbesserung der Diagnostikmöglichkeiten und der Schaffung von Handelseinschränkungen dringend notwendig.

Keywords: paratuberculosis, cattle herds, ELISA, seroprevalence,
Austria.

Summary
Comparison of two studies concerning the prevalence of bovine paratuberculosis (Johne´s Disease) in Austrian cattle in the years 1995 - 97 and 2002/03

Introduction
Paratuberculosis (Johne´s disease) is a chronic infectious disease in ruminants caused by Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis
(MAP), which is widely distributed throughout the world. Economic losses associated with paratuberculosis due to decreased milk production, reduction in fertility and premature culling can be high in
affected herds.

Methods
From 1995 to 1997 the prevalence of antibodies against MAP was examined in 2.757 Austrian cattle farms (GASTEINER et al., 1999). Statistically balanced serum samples were obtained from the 4 oldest cattle per farm and analysed using the Allied-ELISA (Allied Monitor, Fayette, USA). Positive and questionable samples were
subjected to further testing with the more specific H-ELISA (Institute of Microbiology, University of Veterinary Science Hannover, Germany). In a second study cattle slaughtered in Austria in 2002 and 2003 from 756 farms were tested serologically for the presence of antibodies against MAP (DREIER, 2003). Animals were chosen in a way to achieve statistically balanced samples from all parts of Austria and had to be at least 2 years of age. Blood serum was
analysed using the SvanovirTM-ELISA (Svanova Biotech, Uppsala, Sweden).

Results
In 1995 - 97 antibodies against MAP were found in 6.97.% of the farms. 14.54 % had a questionable result in at least one cow, and 78.49 % of the farms were tested negative for MAP (GASTEINER et al., 1999). The study performed in the years 2002/2003 revealed 19.05 % positive farms, 10.05 % were questionable and 70.90 %
showed no antibodies against MAP(DREIER, 2003).

Conclusion
These findings show for the first time the rapid increase of the incidence of paratuberculosis in a middle European country during the last years and indicate a possibly similar development in other areas. Concerning the increasing role of paratuberculosis, the
Austrian Federal Ministry of Health and Women is currently planning actions to eliminate cases of clinical paratuberculosis in the Austrian cattle population.

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