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INHALT WTM 05+06/2010

B.WOLFESBERGER
A quick guide through the feline lymphoma complex
Ein Überblick über das Lymphom bei Katzen

B. KHAYAL, M. HESS and Z. BAGÓ
Pathomorphological investigations on wild birds during the winter season 2005/2006
Pathomorphologische Untersuchung von Wildvögeln (Winter 2005/2006)

L.E. RAY1, J. SCHERZER, W.M. GRAVES and G.L. HEUSNER
A novel approach to cryopreservation of porcine embryos by vitrification after blastocoelic micromanipulation
Ein neuer Ansatz zur Kryokonservierung von Schweineembryonen unter der Verwendung der Vitrifizierung nach dem Entfernen von Flüssigkeit aus dem Blastozoel

B. REBEL-BAUDER, F. KÜNZEL, M. C. SCHWEDA, J. HASSAN, R. HIRT und A. URL
Ein Fall von Coccidioidomykose bei einem Hund in Österreich
A case of coccidioidomycosis of a dog in Austria

S. ABDEL-RAHEEM, M. SCHREINER and C. IBEN
Lactational and seasonal variations in plasma fatty acids profiles in dairy cows
Veränderungen des Fettsäurenmusters im Plasma bei Kühen in Abhängigkeit von der Jahreszeit und dem Laktationsstadium

B. RICHTER und A. KÜBBER-HEISS
Erstmaliger Nachweis der Chytridiomykose in Verbindung mit Todesfällen bei Pfeilgiftfröschen (Dendrobates tinctorius ) in Österreich
First detection of chytridiomycosis associated with fatalities in poison dart frogs (Dendrobates tinctorius) in Austria

From the Clinic for Companion Animal Medicine, Unit for Internal Medicine, Clinical Department for Companion Animals and Horses, University for Veterinary Medicine Vienna, Austria

Keywords: feline lymphoma, anatomic classification, staging, pathohistological classification, chemotherapy, radiotherapy.

Summary
Lymphoma represents the most common malignant tumour in cats. Genetic factors, retrovirusinfections, chronic inflammation, immunosuppression and passive smoking are discussed as possible causes. Clinical signs at presentation normally depend on the anatomic site of the tumour. The alimentary form occurs most frequently with an increasing incidence, followed by extranodal, nodal and mediastinal lymphoma. Cytology is an important diagnostic tool and samples can be obtained by ultrasound-guided fine needle aspiration and thoracocentesis. For the most part the tentative diagnosis can be confirmed by the results of the cytological examination, however a histopathologic examination is essential for establishing a state of the art diagnosis. At present a reorganisation of the pathohistologic classification systems takes place, replacing the older WF (Working Formulation) for the newer REAL/WHO (revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms/World Health Organisation) Classification. The latter evaluates not only the morphology but includes also the immunophenotype of neoplastic cells. The cornerstone of lymphoma treatment, prevalently a systemic disease, is chemotherapy, which in general is tolerated mostly well by cats. Radiation therapy has proven successful especially in nasal lymphoma. Its usefulness in all other forms is not known yet. Additionally, the impact of sugery as part of therapy is still unclear, with insufficient studies performed. Prognosis of nasal or nodal lymphoma appears to be fair to good, cats showing a prolonged survival of about 1 to 2 years. Mediastinal, spinal, renal and alimentary lymphomas have a less favourable prognosis, median survival times of less than 6 months are quite common.

Schlüsselwörter: felines Lymphom, anatomische Klassifikation, Stadieneinteilung, pathohistologische Klassifikation, Chemotherapie, Bestrahlungstherapie.

Zusammenfassung
Ein Überblick über das Lymphom bei Katzen

Lymphome stellen die häufigsten malignen Tumore bei der Katze dar. Als mögliche Ursachen werden neben genetischen Faktoren, Retrovirusinfektionen, chronische Entzündungen, Immunsuppression und passives Rauchen diskutiert. Klinische Symptome bei der Erstvorstellung sind unterschiedlich je nach der anatomischen Lokalisation des Tumors. Neben extranodalem, nodalem und mediastinalem Lymphom kommt am häufigsten und mit steigender Tendenz die alimentäre Form bei Katzen vor. Die Zytologie stellt eine sehr wichtige diagnostische Maßnahme dar. Proben für eine zytologische Untersuchung können durch ultraschallgeführte Feinnadelaspiration oder eine Thorakozentese gewonnen werden. Die Ergebnisse der zytologischen Untersuchung bestätigt meist die Verdachtsdiagnose Lymphom, allerdings ist für eine genaue Subtypisierung der unterschiedlichen Lymphomerkrankungen eine pathohistologische Untersuchung essentiell. Zur Zeit erfolgt eine Umstellung der pathohistologischen Klassifikationssysteme von der älteren WF (Working Formulation) auf die neuere REAL/WHO (revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms/ World Health Organisation) Klassifikation; letzere beurteilt nicht nur die Morphologie der neoplastischen Zellen, sondern inkludiert auch deren Immunphenotyp. Als fast ausschließlich systemische Erkrankung ist der Hauptpfeiler der Lymphomtherapie nach wie vor die Chemotherapie, die von Katzen im Allgemeinen gut vertragen wird. Die Bestrahlungstherapie zeigt vor allem beim nasalen Lymphom Erfolge, der Nutzen bei allen anderen Formen ist noch nicht bekannt. Auch der Stellenwert der Chirurgie als Teil der Therapie ist noch unklar und nicht ausreichend durch Studien belegt. Die Prognose von nasalen und nodalen Lymphomen erscheint angemessen bis gut, da die Katzen ein längeres Überleben von 1 bis 2 Jahren zeigen. Mediastinales, spinales, renales und alimentäres Lymphom haben eine weniger günstige Prognose, mediane Überlebenszeiten von weniger als 6 Monaten sind relativ häufig.

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From the Austrian Agency for Health and Food Safety (AGES), Institute for Veterinary Disease Control, and the Clinic for Avian, Reptile and Fish Medicine, Department for Farm Animals and Veterinary Public Health, University of Veterinary Medicine

Pathomorphological investigations on wild birds during the winter season 2005/2006

B. KHAYAL, M. HESS and Z. BAGÓ
Wien. Tierärztl. Mschr. - Vet. Med. Austria 97 (2010), 125 - 134

Keywords: wild birds, pathology, parasites, siderosis, toxoplasmosis, mycobacteriosis, inflammation, amyloidosis, avian influenza.

Summary
The highly pathogenic avian influenza (HPAI) epidemic throughout Europe required submission of numerous wild birds to diagnostic institutes for investigation. From October 2005 to late 2006, the Austrian Reference Laboratory for Avian Influenza at the AGES received about 5,000 wild bird carcasses for examination and H5N1 testing. A total of 400 carcasses including 369 wild birds were processed for further pathomorphological investigations after having been tested for HPAI by real time RT-PCR. Real time RT-PCR revealed that all investigated birds tested negative for the influenza A viral genome. Furthermore, routine histopathology on formaldehyde-fixed and paraffin-embedded tissue samples and HE staining were performed. Special staining was applied to some samples to confirm any suspected changes. The pathomorphological findings were classified into the following main categories: Organic changes: inflammatory changes: hepatitis (219), enteritis (205), pneumonia (107), tracheitis (40), nephritis (17), myocarditis (9), serositis (7), meningoencephalitis (6), pancreatitis (5) and splenitis (4); degenerative changes: hepatic fatty degeneration (57) and tubulonephrosis (9); intra- and extracellular deposition: hepatic siderosis (114), pulmonary anthracosis (58), amyloidosis (15) and renal tubular concrements (4). General etiology: trauma (177), bacterial infection (89) (2 of which were diagnosed as mycobacteriosis, the rest unclassified), parasitic infestation (24, including protozoan [4] and metazoan [20] parasites), mycosis (8), starvation (43) and poisoning (2, suspicion of ethylene-glycol poisoning). In this study, trauma and starvation accounted for 60 % of the mortality; these can most likely be linked to the very cold weather conditions and possibly to the increased movements of birds in search of food. Pulmonary anthracosis seems to be an indicator of environmental pollution. No pathomorphological changes typical for lead poisoning were recorded. The detected infectious diseases caused by various pathogens played an important role in the wild bird mortalities. These diseases need to be considered for further detailed epidemiological analysis and study.

Schlüsselwörter: Wildvögel, Pathologie, Parasiten, Siderose, Toxoplasmose, Mykobakteriose, Entzündung, Amyloidose, aviäre Influenza.

Zusammenfassung
Pathomorphologische Untersuchung von Wildvögeln (Winter 2005/2006)

Die in den Jahren 2005/2006 aufgetretene Epidemie durch die hochpathologe aviäre Influenza (HPAI) in ganz Europa machte die Untersuchung zahlreicher verendeter Wildvögel notwendig. Aus diesem Grund erhielt das österreichische nationale Referenzlabor für aviäre Influenza der AGES im Zeitraum zwischen Oktober 2005 und Dezember 2006 etwa 5.000 verendete Wildvögel, um diese auf die Präsenz von H5N1-Virus zu prüfen. Dabei wurden insgesamt 400 Vögel (davon 369 Wildvögel) die in der real time RT-PCR auf HPAI ein negatives Ergebnis gezeigt hatten, zusätzlich pathologischanatomisch untersucht. Anschließend wurden ausgewählte Formaldehyd-fixierte und in Paraffin eingebettete Organproben unter der Anwendung von HE-Färbung, sowie - falls erforderlich - Spezialfärbungen bzw. Immunhistochemie histologisch untersucht. Die pathomorphologischen Befunde wurden in folgende Hauptkategorien gemäß der allgemeinen Pathologie eingeteilt: Organische Veränderungen: Entzündung: Hepatitis (219), Enteritis (205), Pneumonie (107), Tracheitis (40), Nephritis (17), Myokarditis (9), Serositis (7), Meningoenzephalitis (6), Pankreatitis (5) und Splenitis (4); degenerative Veränderungen: Leberverfettung (57) und Tubolonephrose (9); intra- und extrazelluläre Ablagerungen: Lebersiderose (114), Anthrakose der Lunge (58), Amyloidose (15) und tubuläre Konkremente der Niere (4). Allgemeine Atiologie: Trauma (117), bakterielle Infektion (89, wobei bei 2 Proben eine Mykobakteriose vorlag), Parasitose (24, Protozoen [4], metazoische Parasiten [20]), Mykose (8), Hungertod (43) und Intoxikation (2, Verdacht auf Ethylenglykol- Vergiftung). In dieser Studie waren Trauma und Hungertod für 60 % der Mortalität verantwortlich, vermutlich zurückzuführen auf die damals äußerst harten Wetterbdingungen und die daraus resultierende erschwerte Nahrungssuche, die die körperliche Auszehrung der Vögel zur Folge hatte. Die häufig festgestellte Lungenanthrakose könnte einen Hinweis auf die globale Umweltverschmutzung geben. Es wurden keine typischen pathomorphologischen Merkmale einer Bleivergiftung entdeckt. Die nachgewiesenen Infektionskrankheiten durch verschiedene Pathogene spielen neben Traumata und Hungertod offensichtlich eine wichtige Rolle in der Mortalität freier Wildvögel, es sind jedoch weitere epidemiologische Untersuchungen mit Schwerpunkt Mikrobiologie notwendig.


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From the Departments of Animal and Dairy Science, College of Agricultural and Environmental Sciences, and the Large Animal Medicine, College of Veterinary Medicine, University of Georgia, Athens, USA

A novel approach to cryopreservation of porcine embryos by vitrification after blastocoelic micromanipulation

L.E. RAY, J. SCHERZER, W.M. GRAVES and G.L. HEUSNER
Wien. Tierärztl. Mschr. - Vet. Med. Austria 97 (2010), 135 - 140

Keywords: porcine embryo, blastocoelic micromanipulation, cryopreservation, vitrification.

Summary
In this study, the effects of the reduction of blastocoelic fluid prior to vitrification were examined on porcine embryos (n=44; 160-540 μm in size; graded excellent (1) according to IETS guidelines). The embryos were either assigned to a control group (n=24) or to the experimental group (n=20) which differed in that blastocoelic fluid was aspirated before microinfusion of vitrification solution 1 (VS1; 1.4 M glycerol in PBS). During the vitrification procedure, the embryos were exposed to 2 cryopreservation solutions, VS1 and VS2 (1.4 M glycerol plus 3.6 M ethylene glycol in PBS), for 5 minutes each, and then to a third cryopreservative, VS3 (3.4 M glycerol and 6.6 M ethylene glycol in PBS), for 1 minute. The straws with embryos were placed in a cooled plastic goblet surrounded by liquid nitrogen vapors for 1 minute and then immersed into the liquid nitrogen for rapid freezing through the phase transition point. The embryos were thawed at 30 °C for 15 s in a water bath and cultured for a period of 24 hrs in NCSU media. Morphological evaluation of the embryos using a stereomicroscope revealed, that initial re-expansion was complete in 16 of the treated and 7 of the control embryos. This demonstrated a significant difference between treatment and control groups at thaw in the recovery of apparently functional embryos (p < 0.001). All embryos from both treatments were degenerated after 24 hrs of culture.

Schlüsselwörter: Schweineembryo, Mikromanipulation des Blastozoels, Kryokonservierung, Vitrifizierung.

Zusammenfassung
Ein neuer Ansatz zur Kryokonservierung von Schweineembryonen unter der Verwendung der Vitrifizierung nach dem Entfernen von Flüssigkeit aus dem Blastozoel

In dieser Studie wurde die Auswirkung der Entfernung von Flüssigkeit aus dem Blastozoel von Schweineembryonen vor der Vitrifizierung untersucht (n=44; 160-540 μm Durchmesser; sehr gute Qualität nach IETS Richtlinien). Die Embryonen wurden entweder einer Kontrollgruppe (n=24) oder einer Versuchsgruppe (n=20), in der Flüssigkeit aus dem Blastozoel entfernt wurde und Mikroinfusion von Vitrifizierungslösung 1 (VS1;1.4 M Glyzerol in PBS) erfolgte, zugeteilt. Während der Vitrifizierung wurden die Embryonen der VS1 und VS2 (1.4 M Glyzerol und zusätzlich 3.6 M Ethylenglykol in PBS) für jeweils 5 Minuten ausgesetzt, und der VS3 (3.4 M Glyzerol und 6.6 M Ethylenglykol in PBS) für 1 Minute. Die Röhrchen mit den Embryonen wurden für 1 weitere Minute in einem Goblet, das von flüssigem Stickstoff umgeben war, abgekühlt und zum Abschluss in flüssigem Stickstoff eingetaucht. Die Embryonen wurden dann bei 30 °C für 15 Sekunden im Wasserbad aufgetaut und für eine Zeitdauer von 24 Stunden in NCSU Medium kultiviert. Die morphologische Beurteilung der Embryonen mit einem Stereomikroskop ergab, dass das Blastozoel von 16 Embryonen aus der Versuchsgruppe und 7 Embryonen der Kontrollgruppe komplett expandierte. Der Unterschied zwischen Versuchs- und Kontrollgruppe im Bezug auf die Expansion des Blastozoels der Embryonen nach dem Auftauen war signifikant (p < 0.001). Nach 24 Stunden Kultur waren die Embryonen beider Versuchsgruppen degeneriert.

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Aus dem Department für Pathobiologie, Institut für Pathologie und Gerichtliche Veterinärmedizin und aus dem Klinischen Department für Kleintiere und Pferde, Klinik für Interne Medizin und Seuchenlehre sowie Abteilung für Bildgebende Diagnostik, der Veterinärmedizinischen Universität Wien

Ein Fall von Coccidioidomykose bei einem Hund in Österreich

B. REBEL-BAUDER, F. KÜNZEL, M. C. SCHWEDA, J. HASSAN, R. HIRT und A. URL
Wien. Tierärztl. Mschr. - Vet. Med. Austria 97 (2010), 141 - 148

Schlüsselwörter: Coccidioidomykose, Coccidioides immitis, Pilz, Hund, in situ Hybridisierung, Österreich, Reiseanamnese.

Zusammenfassung
Ein 4jähriger Mischlingsrüde wurde wegen therapieresistenten Hustens und Fiebers sowie einer intermittierend auftretenden Lahmheit der rechten Vorderextremität an der Veterinärmedizinischen Universität Wien vorgestellt. Die Erhebung der Reiseanamnese des Hundes ergab wiederholte Aufenthalte in Kalifornien. Im Rahmen der diagnostischen Aufarbeitung verstarb der Hund, und die Lunge wurde zur endgültigen diagnostischen Abklärung an das Institut für Pathologie übermittelt. Die pathohistologische Untersuchung und in situ Hybridisierung (ISH) ergaben eine durch Infektion mit Coccidioides immitis, einem in Österreich nicht endemischen Schlauchpilz, verursachte pyogranulomatöse Pneumonie. Im Hinblick auf die immer größer werdende Mobilität von Besitzern und ihren Hunden, ist auch in Österreich mit „neuen“ Infektionserregern zu rechnen, wodurch der Ermittlung einer fundierten Reiseanamnese größere Bedeutung zukommt.

Keywords: coccidioidomycosis, Coccidioides immitis, fungi, dog, in situ hybridization, Austria, travelling-anamnesis.

Summary
A case of coccidioidomycosis of a dog in Austria

Introduction
Coccidioides immitis is a dimorphic fungus endemic in arid climates of Northern and Southern America causing coccidioidomycosis (Valley Fever, Desert Fever or Desert Rheumatism) in man and several animal species, including dogs. After aerogenous infection by inhaling arthrospores they disperse along the bronchial tree into the alveoli where they are phagocytosed. The arthrospores experience structural changes into spherules, undergo endosporulation and release thousands of endospores in the surrounding tissue. Infection usually remains localized in the lungs and in the hilar lymph nodes, but sometimes the infection generalizes into bones, joints, lymph nodes and skin.
Case report
A cross-breed dog aged 4 years was referred to the University of Veterinary Medicine Vienna with a history of persistent cough, fever and intermittent lameness of the right front limb. The dog was presented with history of repeated visits in California. The dog died during diagnostic work-up and the lung was sent to the Institute of Pathology for further examinations.
Material and methods
For pathohistologic diagnosis and representation of the fungi, HE (Haematoxylin and Eosin)-, GMS (Grocott’s Methenamin Silver)-, PAS (Periodic Acid Schiff)-, and Gram-staining was performed on formaldehyde-fixed, paraffin-embedded sections of the lung. Species-specific characterization of the fungi was done by ISH (in situ hybridization) using oligonucleotid probes designed for identification of Coccidioides immitis and Blastocystis dermatitidis by HAYDEN et al. (2001).
Results
Pathohistologic diagnosis and ISH revealed a pyogranulomatous infection of the lungs caused by Coccidioides immitis, a member of sac fungi not endemic in Austria.
Conclusion
On account of the increasing mobility of owners and their dogs, foreign infectious agents may occur in Austria bringing into focus the importance of meaningful travelling anamnesis surveillance.

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From the Department of Farm Animals and Veterinary Public Health, Institute of Animal Nutrition, University of Veterinary Medicine, Vienna, and the Department of Food Science and Technology, University of Natural Resources and Applied Life Sciences, Vienna

Lactational and seasonal variations in plasma fatty acids profiles in dairy cows

S. ABDEL-RAHEEM, M. SCHREINER and C. IBEN
Wien. Tierärztl. Mschr. - Vet. Med. Austria 97 (2010), 149 - 156

Keywords: Simmental cow, lactation stage, season, polyunsaturated fatty acids.

Summary
Between April 2006 and February 2008 plasma long chain fatty acids (LCFA) profiles were assessed every 8 weeks on individual blood samples from 27 Simmental cows, with lactation number from 1 to 6 selected from a dairy herd. Body condition score (BCS) and back fat thickness (BFT) were measured on the same day as the blood was taken. Assessment of the variability of plasma LCFA in relation to the influences of stage of lactation and season of the year was the main objective of this study. All of the fatty acids analysed presented differences (p<0.05) due to the stage of lactation as a factor. Plasma total LCFA amounts (μg/ml) were higher in early lactation (1,641.4±513.85) in comparison with late lactation (1,473.67±336.05) and with dry Simmental cows (1,208.5±396.55). The sum of plasma MUFA (% of total fatty acids) was higher in the period of negative energy balance in early lactation (14.39 ± 4.00) in comparison with mid (11.79 ± 1.99) and late (11.93 ± 2.14) lactation. Moreover, the sum of SFA was significantly higher in dry than lactating cows. Season had an impact on the sum of SFA (% of total fatty acids) which was higher in winter than summer, while the sum of ω-3 PUFA was higher in summer than winter. Also some individual plasma LCFA were significantly affected by the season and some individual plasma LCFA were affected by the interaction between stage of lactation and season of the year. In conclusion, the fatty acids profiles of Simmental cows were affected mainly by the stage of lactation and to a lesser extent by the season of the year.

Schlüsselwörter: Fleckviehkühe, Laktationsstadium, Jahreszeit, mehrfach ungesättigte Fettsäuren.

Zusammenfassung
Veränderungen des Fettsäurenmusters im Plasma bei Kühen in Abhängigkeit von der Jahreszeit und dem Laktationsstadium

Zwischen April 2006 und Februar 2008 wurden in 8wöchigen Abständen von 27 Fleckviehkühen, die 1 bis 6 Laktationen aufwiesen, Blutproben entnommen. Der Ernährungszustand und die Rückenfettdicke wurden ebenfalls ermittelt. Die Tiere erhielten während der gesamten Untersuchungsperiode Heu und Silage sowie Kraftfutter entsprechend ihrer Milchleistung. Das Fettsäurenmuster ebenso wie die einzelnen Fettsäuren (FA; C14 bis C22) im Plasma waren in Abhängigkeit vom Laktationsstadium (früh: 1. bis100. Tag; mittel: 101. bis 200. Tag; spät: 201. bis 300. Tag; Trockenstehperiode) unterschiedlich (p<0,05). Der Gesamtgehalt an Fettsäuren (μg/ml) war in der Frühlaktation höher (1.641,4±513,85) als in der Spätlaktation (1.473,67±336,05) und in der Trockenstehperiode (1.208,5±396,55). Die Summe der einfach-ungesättigten Fettsäuren (MUFA; % des Gesamtgehaltes an FA) war in der Frühlaktation, in der eine negative Energiebilanz vorherrschte, höher (14,39±4) als in den folgenden Perioden (mittel: 11,79±1,99; spät: 11,93±2,14). Der Prozentanteil an gesättigten FA (SFA) war bei den trockenstehenden Kühen signifikant höher. Die jahreszeitlich bedingten Änderungen des Fettsäurenmusters im Plasma betrafen die SFA, die im Winter einen höheren Prozentanteil aufwiesen als im Sommer, während die mehrfach ungesättigten FA (PUFA) der ω-3-Serie im Sommer höher waren. Zusätzlich wurden einige spezielle FA durch die Jahreszeit beeinflusst und einige durch die Interaktion zwischen Jahreszeit und Laktationsstadium. Der Einfluss des Laktationsstadiums auf das Fettsäurenmuster war wesentlich höher als die jahreszeitlichen Einflüsse.

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Aus dem Institut für Pathologie und Gerichtliche Veterinärmedizin, Department für Pathobiologie und dem Forschungsinstitut für Wildtierkunde und Ökologie der Veterinärmedizinischen Universität Wien

Erstmaliger Nachweis der Chytridiomykose in Verbindung mit Todesfällen bei Pfeilgiftfröschen (Dendrobates tinctorius ) in Österreich

B. RICHTER und A. KÜBBER-HEISS
Wien. Tierärztl. Mschr. - Vet. Med. Austria 97 (2010), 157 - 160

Schlüsselwörter: Batrachochytrium dendrobatidis, Chytridiomykose, Amphibien, Österreich, Pfeilgiftfrosch.

Zusammenfassung
In einen privaten Bestand mit 5 Pfeilgiftfröschen (Dendrobates tinctorius) wurde ein Neuzugang aus einer österreichischen Tierhandlung eingebracht. Nach 6 Wochen erkrankte der neue Pfeilgiftfrosch mit den unspezifischen Symptomen Inappetenz und Apathie und verstarb 2 Wochen später. Im Abstand von wiederum etwa 2 Wochen folgten weitere Todesfälle von 4 Altfröschen. Auf der Haut eines Frosches wurden makroskopisch und mikroskopisch abgelöste Hautfetzen festgestellt. Die histologische Untersuchung dieses sowie eines weiteren Frosches ergab eine mäßige Hyperkeratose verbunden mit einem mittel- bis hochgradigen Befall der oberen Hautschichten mit Entwicklungsstadien von Batrachochytrium dendrobatidis vor allem an den Hinterextremitäten. Dies ist der erste Bericht der Chytridiomykose bei in Gefangenschaft gehaltenen Fröschen in Österreich in Verbindung mit Erkrankungsund Todesfällen.

Keywords: Batrachochytrium dendrobatidis, chytridiomycosis, amphibia, Austria, poison dart frog.

Summary
First detection of chytridiomycosis associated with fatalities in poison dart frogs (Dendrobates tinctorius) in Austria

Introduction
Batrachochytrium dendrobatidis, the causative agent of chytridiomycosis in amphibians, has been found in wild amphibians in Austria without correlation to fatalities. Though fatal chytridiomycosis is a common disease internationally, it has never been reported in Austrian captive amphibians. Into a private collection of 5 poison dart frogs (Dendrobates tinctorius) a new frog acquired from an Austrian pet shop was introduced. After 6 weeks the new frog showed signs of inappetence and apathy and died 2 weeks later. At an interval of about 2 weeks further fatalities occurred in 4 of the original frogs.
Materials and methods
2 frogs were submitted for post-mortem diagnostics including pathological, microbiological and microscopical examination. For histopathology standard Hematoxylin- Eosin staining as well as Periodic Acid Schiff reaction and Grocott’s silver stain were used.
Results
In one frog frazzled pieces of skin were visible macroscopically and microscopically. Histological examination of this and another frog showed a moderate hyperkeratosis associated with a moderate to extensive infestation of superficial skin layers with developmental stages of Batrachochytrium dendrobatidis especially on the hind limbs. Microbiological examination resulted in detection of normal gut flora.
Discussion
This is the first description of chytridiomycosis in captive frogs in Austria associated with disease and fatality in the collection. This dermal mycosis poses a serious risk for exotic amphibian species in Central Europe, while native amphibians in Central Europe seem to develop only subclinical infections. Newly acquired exotic amphibians should be put under quarantine for at least 2 to 3 months to prevent diseases to spread within a collection.

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